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孔雀石綠和結晶紫是一類三苯甲烷類染料，zui先應用在紡織工藝，因其具有消毒和殺菌作用而被廣泛應用于水產品的養殖過程中。由于孔雀石綠和結晶紫具有高毒、高殘留和致癌、致畸、致突變等特點，當其進入生物體內，會產生具有更強危害的隱色孔雀石綠和隱色結晶紫。因此，包括中國在內的許多國家都將其列為水產養殖中的禁用藥物。

目前國內外檢測孔雀石綠、結晶紫的分析方法有氣相色譜質譜法、液相色譜法和液相色譜-質譜法，同時國內檢測此類藥物的標準方法有《GB/T 19857-2005 水產品中孔雀石綠和結晶紫殘留量的測定》、《SN/T 1768-2006 水產品中孔雀石綠和結品紫及其代謝產物的快速測定方法》等。

方法優勢：

本方法基于QuEChERS方法原理，采用酸化乙腈提取，QuEChERS凈化，通過UPLC-MS/MS檢測。

1. 方法前處理過程簡單、方便，并能同時檢測孔雀石綠，無色孔雀石綠，結晶紫，無色結晶紫；

2. 適合水產品和飼料樣品的檢測，節省時間，降低基質效應，回收率達80%以上；

3. 本方案4種化合物的方法定量限均為0.5 μg/kg，同國標方法《GB/T 19857-2005 水產品中孔雀石綠和結晶紫殘留量的測定》一致，可供廣大分析工作者使用。

以下為詳細解決方案，敬請參考！

水產品和飼料中孔雀石綠和結晶紫及其代謝物殘留量的測定——UPLC-MS/MS法

1、適用范圍

適用于魚、蝦、貝、蟹等水產品及其飼料中孔雀石綠、結晶紫、隱色結晶紫、隱色孔雀石綠的測定，本方法定量限為0.5 μg/kg。

2、提取

稱2.0 g樣品于50 mL離心管中，加入2.0 g氯化鈉，攪勻，加20 mL 1%甲酸乙腈，渦旋混合1 min，振蕩10 min，6000 rpm下離心2 min，取 10 mL上清液待凈化。

3、凈化——ProElut QuE 15 mL Tube - AOAC (Cat#：64506)

1. 將10 mL 提取液轉移到15 mL凈化管中，振蕩5 min，6000 rpm下離心2 min；

2. 取上清液5 mL，40 ℃減壓蒸干，用流動相重新溶解，過微孔濾膜后供LC-MS/MS分析。

備注：同方法制備基質匹配標準溶液。

4、分析條件

4.1 UPLC 條件：

色譜柱：LeapsilC18，100 × 2.1 mm，2.7 μm (Cat#：86005)

流  速：0.3 mL     進樣量：5 μL      柱  溫：35 ℃

流動相： A：5 mmol/mL乙酸銨 + 0.2%乙酸    B：乙腈    A：B=15：85

4.2 質譜條件：

定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

5、添加回收結果

水產品和飼料中孔雀石綠、結晶紫、隱色結晶紫、隱色孔雀石綠的LC-MS/MS檢測添加回收結果

孔雀石綠、結晶紫、隱色孔雀石綠和隱色結晶紫0.5 μg/L MRM色譜圖

孔雀石綠0.5 μg/L XIC色譜圖

結晶紫0.5 μg/L XIC色譜圖

隱色孔雀石綠0.5 μg/L XIC色譜圖

隱色結晶紫0.5 μg/L XIC色譜圖

水產品和飼料中孔雀石綠和結晶紫及其代謝物殘留量的測定相關產品信息：

紅色產品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*