固相萃取柱是基于色譜分離的樣品前處理方法,是近年來應(yīng)用較為普遍成熟的樣品預(yù)處理方法。固相萃取包括固相(具有一定官能團的固體吸附劑)和液相(樣品及溶劑)。由于固相萃取吸附劑具有不同的官能團,能將特定的化合物吸附并保留在固相萃取柱上。
固相萃取柱的流速緩慢
固相萃取過程中流速不能太快,流速太快不利于目標(biāo)化合物在填料上的保留以及溶劑與目標(biāo)化合物或者填料的相互作用,從而影響保留或者洗脫過程。當(dāng)然流速也不能太慢,否則會大大延長前處理的時間。
固相萃取過程中導(dǎo)致流速緩慢的原因有:
(1)樣品粘度高,例如食品中遇到濃縮汁、糖果時,需要對樣品充分稀釋,降低上樣液的濃度;
(2)填料較多或者太緊密,此時需要增強負(fù)壓或者減少填料的使用量;
(3)溶劑極性不匹配,例如淋洗固相萃取柱時,先用水、甲醇,接著用正己烷淋洗,正己烷與前兩者的極性不同,從而導(dǎo)致流速很慢,遇到這種情況,可以增加負(fù)壓或者選用合適的溶劑進行過渡。
固相萃取柱的凈化效果不理想
通常固相萃取柱有兩種凈化模式,一種是采用保留目標(biāo)化合物的模式,另一種是采用保留雜質(zhì)的模式,不管采用哪種模式都需要選擇合適的填料,使得目標(biāo)化合物或者雜質(zhì)能吸附在填料中,同時不需要保留的組分盡可能多的隨著溶劑一同流出固相萃取柱。
在保留化合物模式下凈化樣品時,通常會經(jīng)歷上樣、淋洗和洗脫三個步驟。淋洗和洗脫溶劑選擇的不合適也會使得凈化效果不理想。
例如淋洗液洗脫強度太弱,淋洗時不能將雜質(zhì)淋洗掉,或者洗脫液的強度太強,洗脫時將雜質(zhì)一并洗脫下來,這兩種情況均會導(dǎo)致凈化效果不理想。
由此可見,采用固相萃取柱凈化樣品時,填料、淋洗液和洗脫液的選擇尤為重要。當(dāng)遇到一些復(fù)雜樣品,一種填料不能滿足凈化效果時,可以選擇串聯(lián)固相萃取柱或者采用混合填料的方式進行操作。