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免疫親和柱的特點和操作的具體流程是怎樣的
  • 更新日期:2024-08-23     信息來源:本站      瀏覽次數:2288
    •     免疫親和柱采用高特異性的單克隆抗體,能夠簡單高效的分離和純化食品和飼料中的霉菌毒素,同時具有高滲透性、無需附加壓力、低損耗等特點。測定的基礎是抗原抗體反應,抗體連接在柱體內,樣品經過提取、稀釋,緩慢的通過親和柱,在柱內河豚的毒素與抗體結合,之后洗滌除去沒有被結合的其他無關物質。用洗脫液洗脫河豚的毒素,然后注入到分析儀器中用于檢測。

          免疫親和柱的特點:

          1、采用單克隆免疫技術,可以有效性地將待測成分分離出來,分離效率和回收率高,正確性和可靠性強

          2、實驗穩定性好,重復性強。

          3、純化過程簡單快速,短時間即可處理大量樣品

          4、實驗設備輕便,自動化程度高,操作簡單,對實驗人員要求不高,可在小型試驗場所使用。

          5、無需有毒溶劑,實驗過程安全可靠。

          6、應用范圍廣,可處理多種復雜樣品。

      免疫親和柱

           免疫親和柱的操作流程:

          ①提取:參照GB5009.118-2016中各法,對樣品進行處理。

          ②凈化:以GB5009.118-2016為例說明

          (1)柱子預處理:取出親和柱,恢復至室溫,將上端塞子取出,打開下端堵頭,將柱內保存液流掉至高于凝膠上界面3-5mm處,停止流液。

          (2)加樣:加入處理好的提取濾液,打開下端堵頭,調節流速至1滴/秒,直至空氣進入親和柱中,棄去流出液。

          (3)淋洗:液體*排凈后,用蒸餾水,淋洗,流速為1-2滴/秒,棄掉流出液,抽干。

          (4)洗脫:加入甲醇(色譜級),調節流速為1滴/秒,緩慢洗脫,收集全部洗脫液,用甲醇(色譜級)定容至(即為凈化后的樣品)。

          (5)衍生:將凈化后樣品在50℃下用氮氣吹干,加入二甲基氨基吡啶溶液和蒽腈溶液,在渦旋混合器上混勻,50℃反應,在冰水中冷卻后取出,50℃氮氣吹干,用流動相溶解,待檢測。

          ③檢測

          凈化后樣品可直接用HPLC(高效液相色譜法)、GC-MS(氣相色譜-質譜聯用儀)、ELISA(酶聯免疫吸附法)等方法進行檢測。

    北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

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