聚合物基質液相色譜柱的構造:
色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經過拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。
兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不銹鋼或鈦合金,取決于填料粒度,目的是防止填料漏出,柱內徑一般是根據柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為了避免管壁效應。
聚合物基質液相色譜柱的選擇需遵循的法則:
基質的選擇大致遵循以下法則,硅膠基質的填料被用于大部分的HPLC分析,尤其是小分子量的被分析物,聚合物填料用于大分子量的被分析物質,主要用來制成分子排阻和離子交換柱。
在使用前,進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是較佳條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。
1、確定分離目的確定你的應用是否要求高分離度、短分析時間、高靈敏度、長柱壽命,低的實驗成本等。
2、評估分析物的化學性質評估分析物的化學性質。。諸如化學結構、溶解性、穩定性等。
3、選擇合適的色譜柱了解色譜填料的物理和化學性質。