離子對試劑是由強親水離子形成,反作用于樣品分子的中性離子對。因此,可用于同時分離帶電分子和非帶電分子。反相離子對色譜法是把試劑加入到含水流動相中,被分析的組分離子在流動相中與反離子生成不帶電荷的中性離子,從而增加溶質與非極性固定相的作用,使分配系數增加,改善分離效果。
它的種類和濃度對分離效果都有較大的影響種類的選擇依賴于被分離樣品的性質被分離溶質是強堿,可以是強酸或強堿,弱堿或強酸,弱酸。用于高壓液相離子對萃取的液相色譜法分離分析強極性有機酸和有機堿的好方法。廣泛應用于生物化學,藥物學,和石油化工等領域。
離子對試劑在使用過程中的注意事項:
在分析方法開發中經常使用,分離效果較好,但也有其優缺點,故在日常使用時,應注意一下幾個點:
1.對液相色譜柱的影響
多為不揮發的鹽,而且很難沖洗干凈。使用后的色譜柱容易產生離子對的鹽析出,損壞色譜柱。使用過的色譜柱換到其他流動相使用后重現型較差,一般用過使用的色譜柱都是專用,不建議和其他流動相混用。
2.離子試劑體系不穩定
本身沒有緩沖能力,其濃度與化合物的保留時間有直接的影響,而且對pH值比較敏感,配制流動相時要求準確度較高。否則直接影響實驗的重復性和重現性,系統不穩定。
3.系統平衡時間較長
在流動相和色譜柱之間的平衡時間較長。使用之前需要對色譜柱長時間平衡,梯度方法的平衡要求比較高。